Исследование осадка мочи с помощью светлопольной,
фазово-контрастной и поляризационной микроскопии
Исследование осадка мочи является важным диагностическим тестом, который нередко
недооценивается практическими врачами.
Анализ клинико-лабораторных исследований за 2002-2003 г.г., включавших микроскопию
осадка мочи, (Fogazzi & Garigali, Curr.Opin.Nephrol.& Hypertension, 2003, 12,
625) показал существенную диагностическую роль данного метода при таких заболеваниях
как В-лимфома мочевого пузыря, системный гистоплазмоз, уратная нефропатия, болезнь
Фабри, миеломная нефропатия, гигантоклеточный артерит и системная красная волчанка.
При трансплантации органов и других состояниях, сопровождающихся вторичными иммунодефицитами,
происходит реактивация полиомавируса ВК и появление в моче зараженных вирусом
тубулярных клеток с характерной морфологией, имеющих диагностическое значение.
Лечение рядом препаратов, например, антибиотиком амоксициллином, противовирусным
препаратом ацикловиром или ингибитором протеаз индинавиром, приводит к появлению
в моче кристаллов (кристалурии) и развитию нефропатии.
|
Получение препарата
Исследование мочи начинается с получения осадка путем центрифугирования 10
мл мочи при скорости 3000 об/мин в течение 5 мин. После окончания центрифугирования
надосадочная жидкость, кроме придонных 0.5 мл, сливается. В оставшемся объеме
осадок суспендируется, капля суспензии наносится пипеткой на предметное стекло
и покрывается покровным стеклом. Препарат исследуется с помощью микроскопа Nikon,
модель Eclipse E200 F, оснащенного приспособлениями для исследований в поляризованном
свете и по методу фазового контраста.
Исследование осадка мочи при различных увеличениях
При малом увеличении (10х) и исследовании в светлом поле выявляются
и подсчитываются эпителиальные клетки и мочевые (почечные) цилиндры, представляющие
собой остатки клеток и белковые конгломераты, сохраняющие форму почечных канальцев.
Значительное количество слущенного плоского эпителия свидетельствует о воспалительном
процессе в мочевых путях. Клетки почечного эпителия появляются лишь при поражении
почечных канальцев. Цилиндрурия является одним из самых ранних и самых важных
признаков патологических процессов почечной паренхимы (ткани). Существует несколько
видов цилиндров. Гиалиновые цилиндры происходят из клеток почечных канальцев.
Повышение уровня этих цилиндров отмечается при физической нагрузке, лихорадке,
нефротическом синдроме и др. Зернистые цилиндры образуются в результате разрушения
клеток почечных канальцев и появляются в моче при тяжелых поражениях почек. Восковидные
цилиндры характерны для хронических поражений почек, а эритроцитарные представляют
собой сочетание гематурии и цилиндров. Пигментные цилиндры образуются из гемоглобина,
лейкоцитарные являются комбинацией лейкоцитурии и цилиндров и встречаются при
пиелонефрите.
При большем увеличении (40х) и исследовании по методу фазового контраста
идентифицируются и подсчитываются эритроциты, лейкоциты, дрожжевые клетки и кристаллические
структуры, а также бактерии.
- Гематурия (появление эритроцитов в моче) бывает различной по происхождению
и интенсивности. Кровь в моче - свидетельство серьезного заболевания почек или
мочевого пузыря. Для определения количества выделенных с мочой форменных элементов
крови существуют методы Каковского-Аддиса и Нечипоренко.
- Количество лейкоцитов в осадке значительно возрастает при острых и хронических
почечных заболеваниях, при почечно-каменной болезни и туберкулезе.
- Кристаллы мочевой кислоты появляются при высокой концентрации мочи и ее кислой
реакции, при лейкозе. Большое количество уратов наблюдается при лихорадке, лейкозе
и некоторых других состояниях. Кристаллы фосфата кальция появляются при ревматизме,
анемии. Аморфные фосфаты могут появляться в моче при рвоте, промывании желудка.
Оксалат кальция в моче появляется при употреблении продуктов, богатых щавелевой
кислотой. Кристаллы холестерина характерны для амилоидоза, туберкулеза почек и
др.
- Бактерии в моче могут свидетельствовать о наличии инфекции. Так, бактерии
появляются в моче при острых и хронических пиелонефритах, цистите, уретрите. Нередко,
с целью выяснения чувствительности микробов к тем или иным антибиотикам, а также
с целью уточнения их вида, производится посев мочи на специальные среды.
Исследование осадка мочи в поляризованном свете
Преимуществом данного микроскопического анализа является отсутствие необходимости
фиксации и окрашивания материала. Один и тот же препарат можно исследовать поочередно
в светлом поле, фазовом контрасте и поляризованном свете. Если для идентификации
и подсчета клеток достаточно светлого поля, то бактерии лучше выявляются в фазовом
контрасте, а кристаллы с двойным лучепреломлением видны в поляризованном свете.
Последний метод связан с визуализацией объекта или его элементов в результате
изменения направления поляризации света и проявления анизотропных свойств объекта.
Особенностью микроскопа является наличие в оптической схеме поляфильтров: в осветительной
части - поляризатора, а в промежутке между объективом и окуляром - анализатора.
Во время наблюдения оба поляфильтра развернуты друг относительно друга, и при
этом в выходном зрачке объектива наблюдается максимальное затемнение.
Кристаллы солей или лекарственных препаратов, находящиеся в свободном состоянии
или захваченные лейкоцитами, в поляризованном свете выглядят как игольчатые структуры
на темном фоне, что позволяет легко дифференцировать их от клеточного дебриса,
который при ином методе может маскировать присутствие кристаллов. Микроскоп создает
диаскопическую поляризационную проекцию видимого объекта и благодаря высококачественному
осветителю позволяет получать яркую и четкую картину плохо преломляющих и полупрозрачных
материалов, к которым относятся кристаллы осадка мочи.
Для рутинной микроскопии мочи и мочевого осадка Nikon предлагает модель микроскопа
Eclipse E200 F, оснащенного приспособлениями для исследований в поляризованном
свете и по методу фазового контраста.
|
|
Honorable Mention, 2003 Competition
Edy Kieser Ennenda, Switzerland
Succinic acid and urea (40x)
(Янтарная кислота и мочевина (40x))
Polarized light
Исследование в поляризованном свете
|
Honorable Mention, 2002 Competition
Lars Bech Naardan, The Netherlands
Herceptin® (cancer drug) (55x)
Герцептин (противораковый препарат (55x))
Polarized Light
Исследование в поляризованном свете |
Источник: http://nikon-mikroskope.ru |