Вирусные гепатиты: лабораторная диагностика
Введение
Потребность в интерпретации лабораторных
тестов при вирусных гепатитах больше чем при других инфекционных
заболеваниях, потому что многочисленные тесты, назначаемые при
подозрении на вирусный гепатит, предназначены для решения различных
задач.
Врачами клинико-диагностической
лаборатории ООО «БИОН» подготовлены информационные материалы по
лабораторным тестам при вирусных гепатитах в помощь специалистам.
Гепатит А
Возбудитель
|
Вирус гепатита А (HAV), семейство Picornaviridae, род Hepatoviridae
|
Эпидемиология
|
Распространён по всему миру, самая низкая заболеваемость в Северной и Центральной Европе
|
Пути передачи
|
Почти всегда фекально-оральным путём через загрязненную пищу.
Например, в мидиях вирус может сохраниться в течение многих месяцев.
Из-за гигиенических мер профилактики новые случаи инфекции стали
редкими в Северной Европе. Встречающиеся случаи – чаще привозные.
|
Инкубационный период
|
2 – 6 недель
|
Клиническая картина
|
Всегда острый гепатит, часто проходящий незамеченным у детей,
живущих в эндемичных районах. У взрослых течение болезни более
тяжёлое, в редких случаях приводит к печеночной недостаточности.
Никогда не переходит в хроническую форму и никогда не вызывает цирроз
печени. Вирус выделяется с калом.
|
Группы риска
|
Медицинский персонал, сантехники, рабочие водоканала, наркоманы, и
т.д. Жители эндемичных районов, особенно старшего возраста,
путешественники. Инфицирование HCV-положительных пациентов вирусом
гепатита А может привести к тяжёлой форме заболевания.
|
Вакцинация
|
При активной иммунизации длительно сохраняется иммунитет (10 лет).
Иммунизация может быть проведена даже перед поездкой. Возможна также
пассивная иммунизация в случае контакта с зараженными людьми.
|
Диагностика гепатита А.
Наименование исследования
|
Клиническое значение
|
Антитела к вирусу гепатита А (anti-HAV) суммарные
|
Определяются антитела классов IgG и IgM. Скрининговый тест при
подозрении на новую или прошлую инфекцию. В начале заболевания может
быть отрицательным. Тест может также использоваться для оценки
напряжённости иммунитета перед прививкой.
|
Антитела к вирусу гепатита А (anti-HAV) IgM
|
Положительный в случае новой инфекции. Следует отметить, что тест
может быть положительным в течение двух лет после перенесенного
гепатита A. Антитела к HAV класса IgM могут быть положительными в
течение короткого времени после прививки. В редких случаях, например
инфекция вирусом Эпштейна-Барр, тест может быть сомнительным или слабо
положительным.
|
Вирус гепатита А (HAV) ПЦР
|
При гепатите А РНК вируса может определяться в крови.
|
Гепатит В.
Возбудитель
|
Вирус гепатита В (HBV), ДНК-содержащий вирус, семейство Hepadnaviridae, род Orthohepadnaviridae.
|
Эпидемиология
|
Распространён по всему миру, самая высокая заболеваемость в
Юго-восточной Азии и Африке. Распространённость в Центральной Европе –
1-2%. В России больны хроническим гепатитом В около 8 млн. человек.
|
Пути передачи
|
HBV наиболее часто передается при половых контактах. Возможна
вертикальная передача плоду при родах, через кровь от больного
(переливание крови, препаратов крови; татуировки; пирсинг; повреждения
кожи). HBV может обнаруживаться во всех жидкостях организма. Самая
высокая концентрация вируса определяется в крови (до 1000 блн.
инфекционных частиц/мл). Попадание в кровь приблизительно 10 вирусов
достаточно для инфицирования.
|
Инкубационный период
|
2 – 3 месяца, в единичных случаях до 1 года.
|
Клиническая картина
|
HBV может вызывать как острый так и хронический гепатит.
Клиническое течение острого гепатита может быть различным от
инапарантной формы (носительство) до молниеносного течения.
Приблизительно у 10 % инфицированных гепатит В протекает в хронической
форме, выделяют хроническую инфекцию без клинической активности и
хронический гепатит В. Приблизительно у 10 % больных хроническим
гепатитом В развивается цирроз печени. Кроме того, больные хроническим
гепатитом В имеют высокий риск развития гепатоцеллюлярной карциномы.
|
Группы риска
|
Медицинский персонал, лица перенёсшие переливание крови, реципиенты
органов и тканей, диализные больные, лица имеющие контакты с больными
гепатитом В, новорождённые, рожденные от больных матерей, жители
домов инвалидов и престарелых.
|
Вакцинация
|
Иммунизация, является успешной, если титр антител к HBsAg 100
мМЕ/мл или больше спустя 4-8 недель после третьей прививки. В этом
случае, иммунитет к заболеванию может сохраняться достаточно долго (по
крайней мере, 10 лет). Лицам, у которых после 3-х должным образом
проведённых прививок через 8 недель титр антител к HBsAg не повысился,
необходимо провести повторную вакцинацию (другой вакциной или большими
дозами). Все новорождённые и подростки между 12 и 14 годами должны
быть привиты, также как и лица, входящие в группу риска. До проведения
вакцинации необходимо провести исследование на антитела к HBsAg, если
титр антител меньше 10 мМЕ/мл, то необходима срочная вакцинация.
|
Диагностика гепатита В
При гепатите В возможно определение антител, антигенов и ДНК вируса.
Наименование исследования
|
Клиническое значение
|
Поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg)
|
Поверхностный белок вируса гепатита В, обнаруживается в сыворотке в
трех различных формах: на поверхности неповрежденных инфекционных
частиц, или как свободный протеин (нитевидный или сферический).
Основной маркер острого и хронического гепатита В. В большинстве
случаев HBsAg обнаруживается уже в инкубационном периоде и при остром
течении гепатита выявляется в крови в течение 5 - 6 месяцев. Обнаружение
поверхностного антигена вируса гепатита В дольше 6 месяцев после
начала заболевания свидетельствует о возможной хронизации процесса.
Возможно пожизненное носительство HBsAg. Из-за наличия различных форм
HBsAg в сыворотке, при его обнаружении невозможно дифференцировать
заболевание и HBsAg-носительство. Для этого необходимо провести
дополнительные исследования (определение ДНК вируса гепатита В, HBeAg и
антител к HBeAg).
|
Подтверждающий тест на поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg confirmatory)
|
Методы иммуноферментного анализа, применяемые для определения HBsAg
в сыворотке крови, являются скрининговыми, и в очень редких случаях
могут давать ложноположительные результаты. Поэтому в случае получения
положительного результата для подтверждения его специфичности
специалисты лаборатории ставят подтверждающий тест - повторное
исследование сыворотки крови пациента с иммуноингибированием и
разведением. Исследование проводится для подтверждения положительного
результата исследования на HBsAg.
|
Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В (anti–HВs) суммарные
|
Показатель наличия иммунитета к вирусу гепатита В, проводиться
перед вакцинацией и через 4 – 8 недель после вакцинации для контроля
за эффективностью вакцинации.
|
Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В (anti-HBc) IgM
|
Антитела к HBcAg класса IgM выявляются в сыворотке при остром
гепатите и реактивации хронического гепатита. При молниеносной форме
течения заболевания, только этот тест может давать положительный
результат.
|
Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В (anti-HBc) суммарные
|
Определение антител к НBcAg класса IgG применяют в целях
диагностики текущего или перенесенного в прошлом гепатита В. Однако
наличие антител не дает возможности дифференцировать острую,
хроническую или перенесенную в прошлом инфекцию.
|
Антиген инфекционности вируса гепатита В (HВeAg)
|
HBeAg – маркер активной репликации вируса гепатита B. HBеAg
является продуктом распада сердцевинного антигена вируса гепатита В
(НBсAg)
|
Антитела к антигену инфекционности вируса гепатита В (anti-HВe) суммарные
|
Является показателем начала сероконверсии, свидетельствует о
прекращении репликации вируса. Однако обнаружение антител к HBeAg не
всегда является показателем отсутствия инфекционности. Иногда возможно
появление мутантной, дефектной HBeAg-отрицательной формы вируса, т.е.
вирус данный антиген синтезировать не способен или синтезирует в
малых количествах, при этом, хотя в крови обнаруживаются антитела к
HBeAg, высокая репликативная активность вируса сохраняется.
|
Вирус гепатита В (HBV) качественно, ПЦР
|
Определяется ДНК вируса гепатита В в крови. При положительном
результате исследования необходимо провести количественное
исследование.
|
Вирус гепатита В (HBV) количественно, ПЦР
|
Определяется количество копий ДНК вируса гепатита B в 1 мл крови
(вирусная нагрузка). Исследование проводится для контроля за
эффективностью лечения.
|
Гепатит С.
Возбудитель
|
РНК-содержащий вирус, семейство Flaviviridae. В настоящее время
выделяют 8 генотипов (1-7, 10) с многочисленными подгруппами.
|
Эпидемиология
|
Распространён повсеместно, наиболее высокая заболеваемость в Южной
Азии, Египте и Центральной Африке. По данным Robert-Koch-Institute
(RKI) гепатит С является причиной, 20 % острых гепатитов, больше чем
40 % всех случаев цирроза печени, 70-85 % хронических гепатитов, и 60 %
всех опухолей печени.
|
Пути передачи
|
Как и при гепатите В заражение происходит при переливании крови и
продуктов крови. Передача инфекции половым путём, не играет
значительной роли; перинатальная передача низка (4 %). Возможно
заражение при инъекциях, аутогемотерапии, через инструменты
стоматолога, при эндоскопии и т.д.
|
Инкубационный период
|
6 – 12 недель, иногда до 1 года
|
Клиническая картина
|
Острый гепатит С часто имеет умеренное клиническое течение и
остается незамеченным, у 85% заболевших развивается хронический
гепатит и у 20% больных хроническим гепатитом развивается цирроз
печени. Характерной особенностью клинического течения заболевания
является небольшое увеличение активности трансаминаз, которое часто не
связывают с возможностью вирусного гепатита. Это приводит к поздней
диагностике заболевания.
|
Группы риска
|
Медицинский персонал, лица после переливания крови, диализные пациенты, дети, рождённые от матерей больных гепатитом С.
|
Вакцинация
|
В настоящее время вакцин нет
|
Диагностика гепатита С
Наименование исследования
|
Клиническое значение
|
Антитела к вирусу гепатита С (anti-HCV) суммарные
|
Антитела к HCV обычно определяются спустя 6-8 недель после
инфицирования. В единичных случаях позже. Отрицательный результат не
исключает недавно приобретенную инфекцию HCV. Положительный результат
может свидетельствовать об остром или хроническом гепатите С. Данное
исследование не позволяет различить острый и хронический гепатит, а
также стадию выздоровления после гепатита С. Антитела к HCV необходимо
определять у всех пациентов с незначительным повышением активности
трансаминаз и у людей, относящихся к группе риска
|
Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С (anti-HCV confirmatory)
|
Определение суммарных антител к вирусу гепатита С является
скрининговым тестом для диагностики заболевания. В случае получения
положительного результата для подтверждения его специфичности используют
подтверждающий тест - определение широкого спектра антител к белкам
специфичным для вируса гепатита С (сore, NS1 NS2, NS3, NS4, NS5) в
сыворотке крови больного. Исследование считается положительным, если
выявляются антитела к 2 или более белкам вируса гепатита С.
Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С используют для
подтверждения специфичности скринингового метода.
|
Антитела к вирусу гепатита С (anti-HCV) IgМ
|
Положительный результат может свидетельствовать об остром гепатите С
или обострении хронического гепатита С. Отрицательный результат
свидетельствует о том, что гепатит С не выявлен (при отрицательном
результате исследования суммарных антител к гепатиту С), или у пациента
хронический гепатит С вне обострения (при положительном результате
исследования суммарных антител).
|
Вирус гепатита С (HCV) качественно, ПЦР
|
Определяется РНК вируса гепатита С в крови. Положительный результат
свидетельствует о репликации вируса. При положительном результате
должно проводиться количественное исследование, чтобы определить
степень виремии. Метод выбора - так называемый "Real time” ПЦР. РНК
вируса необходимо определять в случае положительного результата
исследования на антитела, кроме того, и при отрицательном результате,
если подозревается гепатит С (особенно в случае диализных пациентов).
Исследование на РНК вируса гепатита С показано для новорожденных,
рождённых от матерей больных гепатитом С. Так как у новорожденных в
крови могут определяться материнские антитела, по этой причине
обнаружение антител к HCV не может использоваться у этой категории
пациентов.
|
Вирус гепатита С (HCV) количественно, ПЦР
|
Исследование проводится для определения вирусной нагрузки.
|
Вирус гепатита С (HCV) (генотипирование), ПЦР
|
Определяется генотип вируса для выбора схемы лечения. В настоящее время в лабораторной практике определяется 5 генотипов.
|
Гепатит D.
Возбудитель
|
Дефектный РНК-содержащий вирус. Для репликации необходим вирус
гепатита В. Обнаруживается только у лиц, инфицированных вирусом
гепатита В.
|
Эпидемиология
|
Низкий уровень заболеваемости в Северной Европе; более высокий в
Средиземноморских странах и в странах Черноморского региона; высокая
заболеваемость в Центральной Африке и Южной Америке.
|
Пути передачи
|
Как и гепатит B парентеральным путем, при переливании зараженной крови, или при сексуальных контактах.
|
Инкубационный период
|
Несколько недель или месяцев
|
Клиническая картина
|
В случае коинфекции (одновременное заражение гепатитом B и
гепатитом D) - острый гепатит с очень тяжёлым клиническим течением,
часто наблюдается высокая смертность. В случае суперинфекции
(заражение вирусом гепатита D HBV-положительных пациентов) развивается
хронический гепатит с более тяжёлым течением, чем просто хронический
гепатит B.
|
Группы риска
|
Такие же, как и для гепатита B, и лица, проживающие в эндемичных областях
|
Вакцинация
|
В настоящее время вакцин против гепатита D нет, но иммунизация против гепатита B защищает от инфицирования
|
Диагностика гепатита D.
Наименование исследования
|
Клиническое значение
|
Антитела к вирусу гепатита D (anti-HDV) IgM
|
Антитела к вирусу гепатита D класса IgМ появляются в острый период
«дельта-инфекции» (со 2-й недели). Антитела IgМ свидетельствуют об
активной репликации вируса. Положительный результат исследования
свидетельствует об остром периоде вирусного гепатита D, ранней стадии
реконвалесценции, или персистирующем вирусном гепатите D.
Отрицательный результат – отсутствие антител класса IgM к вирусу
гепатита D
|
Антитела к вирусу гепатита D (anti-HDV) суммарные
|
Определяются IgG и IgM антитела. Скрининговое исследование,
назначается, если подозревается новая или хроническая инфекция. Антитела
к HDV обнаруживаются спустя 1 - 2 недели после появления клинических
признаков заболевания
|
Вирус гепатита D (HDV) ПЦР
|
РНК к вирусу гепатита D обнаруживается в крови при появлении
клинических признаков заболевания. Как правило, результат исследования
на ДНК вируса гепатита В в этот период отрицательный.
|
Гепатит Е.
Возбудитель
|
РНК-содержащий вирус семейства Caliciviridae
|
Эпидемиология
|
Высокая заболеваемость встречается в Центральной Америке, Южной Азии, и в некоторых регионах Африки
|
Пути передачи
|
Как и у гепатита А – фекально-оральный
|
Инкубационный период
|
4 – 6 недель
|
Клиническая картина
|
Острый гепатит, который никогда не переходит в хроническую форму. У
беременных женщин может развиться тяжёлый гепатит с молниеносной
формой клинического течения с высокой летальностью.
|
Группы риска
|
Жители эндемичных районов, путешественники
|
Вакцинация
|
Вакцин в настоящее время нет
|
Диагностика гепатита Е.
Наименование исследования
|
Клиническое значение
|
Антитела к вирусу гепатита Е (anti-HEV) IgM
|
Обнаружение антител класса IgM к вирусу гепатита Е свидетельствует
об острой стадии гепатита Е. Антитела к вирусу гепатита Е IgM
выявляются в крови после появления желтухи. Чувствительность данного
исследования по данным литературы составляет более 93%. Отрицательный
результат исследования не исключает инфицирования вирусом гепатита Е.
Показания к назначению исследования: наличие клинической картины
заболевания или лабораторных данных (повышение АЛТ, АСТ, билирубина),
обследование в эндемичных районах.
|
Антитела к вирусу гепатита Е (anti-HEV) IgG
|
Антитела класса IgG к вирусу гепатита Е появляются в период разгара
заболевания. Антитела класса IgG могут исчезать после перенесенного
заболевания в течение 6 месяцев, но у некоторых лиц могут определяться
в крови до 6 – 8 лет и более. Показания к назначению исследования:
диагностика гепатита Е, проведение эпидемиологических исследований. |
Источник: http://bion.ru |